Salah satu karya paling terkenal El Greco kemudian melukis “Keturunan Roh Kudus.” Komposisi dinamis terungkap dari bawah ke atas, yang merupakan ciri khas untuk periode akhir karya El Greco.
Dari catatan khusus adalah jenis gerakan dendeng karakteristik El Greco terlambat, seolah-olah dari arus listrik yang terlewatkan; struktur gambar didasarkan pada perbandingan gerak dan kekakuan, mati rasa dan kerohanian, ketidakterbatasan dan isolasi. Namun, gambar luarnya yang spektakuler dilukis seolah-olah dengan hati yang dingin dan tidak membuat kesan yang kuat.
El Greco tidak menyimpang dari penggambaran tradisional kisah Injil tentang turunnya Roh Kudus. Juga secara tradisional Roh Kudus digambarkan sebagai seekor merpati. Tempat sentral dalam komposisi ditempati oleh Maria, dengan penuh hormat mengangkat matanya ke atas, dikelilingi oleh murid-murid Kristus lainnya. Di ruangan gelap yang sempit, meringkuk dalam lingkaran yang sempit, dalam kesedihan dan penganiayaan, mereka tetap setia pada perintah Tuhan “untuk tidak meninggalkan Yerusalem”, di mana mereka paling berisiko dari mereka yang menyalibkan Tuan mereka. Tetapi mukjizat terbesar terjadi – kuasa Roh Kudus ada pada mereka masing-masing, muncul dalam bentuk bahasa roh.
Asumsikan rasul kedua di sebelah kanan adalah potret diri El Greco. Orang yang sama muncul di latar belakang dalam lukisan “Betrothal of the Virgin”, mungkin karya terakhir sang master.
Ada juga asumsi bahwa lukisan “Keturunan Roh Kudus” telah dimodifikasi oleh seniman lain, mungkin Jorge Manuel, putra El Greco.